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    Dojindo Kit-NH2生物素標記試劑盒

    簡要描述:品名:Dojindo Kit-NH2生物素標記試劑盒
    貨號:LK03
    規格型號:3samples/盒

    • 產品型號:LK03
    • 廠商性質:代理商
    • 更新時間:2025-02-11
    • 訪  問  量:3818
    詳細介紹
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    應用領域醫療衛生,生物產業

    品名:Dojindo Kit-NH2生物素標記試劑盒
    貨號:LK03

    規格型號:3samples/盒

    產品特性
    整個標記過程僅需1個小時
    整個標記過程在1支過濾管中進行
    熒光標記抗體回收率高
    適用于50-200 μg的IgG

    Dojindo Biotin Labeling Kit-NH2生物素標記試劑盒 產品描述
    該試劑盒主要用于制備生物素標記的蛋白質,用于酶免疫分析(EIA)。NH2-reactive biotin是試劑盒的成分之一,它含有琥珀酰亞胺基(NHS),能與蛋白質或者其它分子的氨基反應。該試劑盒中包含了標記所需的全部試劑,標記過程十分 簡便。只需將NH2-reactive biotin加入到IgG溶液中,37℃培養10分鐘即可。每個IgG分子平均能夠和5-8個生物素分子結合。過量的生物素分子能夠使用過濾管將其除去。
    Biotin Labeling Kit-NH2 試劑盒內容
    - NH2-Reactive Biotin .......................... 3 tubes
    - WS Buffer ......................................... 4 ml x 1
    - Reaction Buffer ................................. 500 μl x 1
    - Filtration Tube .................................. 3 tubes

     操作步驟
    (1)將100 μl WS buffer以及含有100 μg IgG的樣品溶液加入到過濾管中。a)
    (2)8,000-10,000 g離心10分鐘。b)
    (3)將10 μl DMSO加入到NH2-reactive biotin中并用移液器吹打使其溶解。c)
    (4)將100 μl Reaction buffer以及8 μl NH2-reactive biotin溶液加入到過濾管中,吹打使其混合。d)
    (5)將過濾管放入培養箱中,37℃培養10分鐘。
    (6)將100 μl WS buffer加入到過濾管中,8,000-10,000 g離心10分鐘,b)除去濾液。
    (7)將200 μl WS buffer加入到過濾管中,8,000-10,000 g離心10分鐘,b)重復該步驟一次。
    (8)將200 μl WS buffer加入到過濾管中吹打10-15次來回收標記產物。e)將該溶液轉移到0.5 ml試管中,在0-5℃下保存。
      a)樣品溶液的體積不應超過100 μl。如果抗體濃度低于1 mg/ml,重復步驟1和2直至總的IgG聚積量達到100 μg。如果聚積過程中濾液的體積超過400 μl,則在進行后續的離心操作前應除去濾液。
      b)如果溶液在離心后仍然殘留在膜上,可以再離心5分鐘或者適當增加轉速。
      c)NH2-reactive biotin在管子的底部,向管底加入10 μl DMSO,吹打數次使其溶解。
      d)如果IgG的量為200 μg,在步驟4時加入所有的NH2-reactive biotin溶液。
      e)并不一定要使用WS buffer來回收標記產物,可以選擇任何適合于該實驗的緩沖液來替代。

    注意事項

    用該試劑盒標記的蛋白質的分子量要>50,000。
    在標記過程中,IgG或者biotin-IgG標記物始終在Filtration tube的濾膜上。
    如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白質,如BSA或明膠時,在使用該試劑盒標記前,先要純化IgG溶液。IgG溶液能夠用IgG Purification Kits(不包含于本試劑盒中)來純化。
    如果IgG溶液含有小的不溶物,離心后取上清液來進行標記。
    如果長時間不使用,建議您把試劑盒中的標記試劑NH2-reactive biotin放在-20℃冰箱中保存,不需要充氮氣,可以更好地保持標記試劑的活性,但請不要把其它試劑和過濾管放到-20℃冰箱中,仍請放在0-5℃冰箱中保存。

    品名:Dojindo Kit-NH2生物素標記試劑盒
    貨號:LK03

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