• 服務(wù)熱線

    15021010459
    技術(shù)文章
    當前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > ProteanFect:小鼠原代T細胞從提取到轉(zhuǎn)染全流程攻略

    ProteanFect:小鼠原代T細胞從提取到轉(zhuǎn)染全流程攻略

    更新時間:2025-01-15 點擊次數(shù):634
    小鼠原代T細胞一般從脾臟組織中得到,包括脾臟研磨、細胞分離、純化T細胞等步驟。以下是常用的小鼠原代T細胞提取流程:

    實驗前準備

    1. 材料與試劑:新鮮小鼠脾臟、PBS緩沖液、無菌手術(shù)器械(剪刀、鑷子等)、細胞過濾器、CD4/CD8磁珠分選試劑(如需純化特定亞型),或陰選的方式去除B細胞、單核細胞、NK細胞的磁珠分選試劑,RPMI-1640培養(yǎng)基,人白介素2,胎牛血清,抗生素(如青霉素-鏈霉素)。
    2. 設(shè)備:無菌操作臺、離心機、磁力分選架。

    從小鼠脾臟獲取單細胞懸液

    1. 小鼠頸椎脫臼處死,75%乙醇浸泡5分鐘,取出小鼠置于無菌操作臺上,左腹側(cè)朝上。
    2. 在小鼠左腹側(cè)中部剪開小口,撕開皮膚暴露腹壁,可見紅色長條狀脾臟。
    3. 在脾臟下側(cè)提起腹膜,剪開后上翻,暴露脾臟,用鑷子提起脾臟,眼科剪分離下面的結(jié)締組織,取出脾臟,剝?nèi)ブ車慕Y(jié)締組織,期間用含有2%FBS的PBS溶液保持脾臟濕潤。
    4. 將脾臟放于70UM過濾網(wǎng)中,用注射器針芯輕輕研壓脾臟,用含2%FBS的PBS沖洗過濾網(wǎng),獲細胞懸液。
    5. 300G離心5分鐘,收集細胞沉淀,然后加入紅細胞裂解液裂解,將紅細胞充分裂解,收集白細胞。

    從單細胞懸液中分離小鼠原代T細胞

    1. 全T細胞分離:利用陰選的方式去除B細胞、單核細胞、NK細胞等,按照分選試劑盒的說明書進行。
    2. 亞群分離(如需要CD4+或CD8+ T細胞):
      • 使用CD4或CD8磁珠(如MACS磁珠)分選獲得特定T細胞亞群。
      • 將磁珠標記的細胞懸液置于磁性分選裝置中,分離出目標T細胞亞群。

    培養(yǎng)與檢測

    1. 將分離的T細胞重懸于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中,并加入抗生素與人白介素2。
    2. 細胞密度一般控制在1-2×10^6 CELLS/ML,放入37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

    轉(zhuǎn)染

    西湖凝聚體推出針對小鼠原代T的PT03 PROTEANFECT MAX小鼠原代T細胞轉(zhuǎn)染試劑盒。使用ProteanFect Max遞送EGFP mRNA至小鼠原代T細胞,實現(xiàn)高效表達。

    企業(yè)介紹

    華雅思創(chuàng)生物®專注于提供CGT、分子診斷和先進醫(yī)療的生物試劑和醫(yī)療耗材產(chǎn)品,服務(wù)客戶遍及細胞治療、疫苗抗體、醫(yī)療診斷、腦科學(xué)、合成生物、長壽研究和醫(yī)美保健等領(lǐng)域。"買試劑,找華雅",華雅思創(chuàng)生物®憑借深厚的技術(shù)實力和嚴格的質(zhì)量控制體系,已成為眾多科研機構(gòu)和生物制藥企業(yè)的首·選供應(yīng)商。


    2025 版權(quán)所有 © 重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

    地址:重慶市江北區(qū)金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

    重慶市華雅干細胞技術(shù)有限公司主要經(jīng)營干細胞研究 干細胞治療產(chǎn)品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發(fā)等產(chǎn)品。

    關(guān)注我們

    服務(wù)熱線

    400-021-2200

    掃一掃,關(guān)注我們

    主站蜘蛛池模板: 国产精品久久久99| 午夜成人精品福利网站在线观看| 精品乱子伦一区二区三区高清免费播放 | 欧美成人精品高清在线播放 | 国产成人精品久久综合| 欧美精品一区二区蜜臀亚洲| 久久久不卡国产精品一区二区| 久久精品国产免费一区| 精品无码国产一区二区三区AV| 午夜福利麻豆国产精品| 国产精品国产三级国产AⅤ| 国产精品55夜色66夜色| 久久精品国产第一区二区三区 | 91精品国产综合久久婷婷| 亚洲伊人久久精品影院| 精品无码国产污污污免费网站国产 | 国产精品毛片无遮挡| 亚洲日韩精品一区二区三区 | 久久国产精品国产自线拍免费| 日产精品久久久久久久性色| 亚洲七七久久精品中文国产 | 亚洲av无码成人精品国产 | 国产精品污视频| 精品无码人妻一区二区三区品| 伊人久久精品无码二区麻豆| 无码人妻精品一区二区蜜桃AV| 精品国产香蕉伊思人在线在线亚洲一区二区 | 国产亚洲精品看片在线观看 | 久久se这里只有精品| 99久久精品无码一区二区毛片| 久久精品一区二区三区不卡| 国产91精品一区二区麻豆网站 | 国产精品无码av在线播放| 久久亚洲欧美国产精品| 久久亚洲精品无码AV红樱桃| 少妇人妻精品一区二区三区| 亚洲国产精品无码中文字| 亚洲精品无码成人片久久| 亚洲av成人无码久久精品| 青青草原精品99久久精品66| 久久精品天天中文字幕人妻 |