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    怎樣避免細胞污染

    更新時間:2022-06-27 點擊次數:1002
       細胞是構成人體結構和功能的最基本單位,人體就是由大量的不同類型的細胞組成的,在不同的組織器官,含有不同的細胞,分別具有不同的結構,執行不同的功能。比如血液中有三種血細胞,分別是紅細胞白細胞和血小板,紅細胞具有運輸氧氣和二氧化碳的功能,白細胞在人體的免疫功能中發揮著重要作用,血小板是人體負責止血的血細胞。另外,人體還有多種其他類型的細胞,分別執行著不同的功能。
      怎樣避免細胞污染:
      1.實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風機運轉5-10min再開始實驗操作。
      2.實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內;實驗用品用完應移出超凈臺,以利于空氣的流通;實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
      3.每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養基也不要共享同一瓶培養基,避免細胞間的交叉污染。
      4.操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。
      5.CO2培養箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養箱內壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,最后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水(應每周更換),待培養箱內溫度、濕度、CO2濃度穩定后再放入細胞。
      6.定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。
      注意事項:
      1、 DMSO配制的時候會放熱,一定要等凍存液冷卻后使用,避免灼傷細胞;
      2、 細胞離心后盡量吸干凈上清液,減少培養基殘留,避免稀釋凍存液;
      3、 不建議手動梯度降溫,溫度不穩定,容易降低存活率;
      4、 注意程序降溫盒內異丙醇的量必須高于低刻度線;凍存5次后異丙醇需要更換一次,以免影響凍存效果;程序降溫盒需恢復到室溫以后才能繼續使用,不能從冰箱拿出來直接使用;
      5、 細胞懸液加入凍存液以后盡量短時間的在常溫放置,DMSO常溫下對細胞損傷大,分裝完成后立即轉入程序降溫盒放到-80度冰箱,不需要放4度;
      6、 -80度凍存過夜后可以轉入液氮長期保存,轉入液氮的過程需要對凍存盒進行保冷,不要長時間在常溫暴露,避免凍存管融化;
      7、 若沒有液氮罐,存放在-80度的時候一定要放靠里面的位置,避免開關冰箱導致溫度不穩定。
      8、 細胞凍存后應取出一管復蘇,檢測細胞的存活率。理論上細胞可在液氮內長期保存,為穩妥起見可在細

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