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    ELISA試劑盒操作細節常見問題整理

    更新時間:2022-01-06 點擊次數:1908
    1)問:是不是空白對照就是什么都不加?  
    答:不加樣本,不加樣本稀釋液,不加酶標試劑,其他都可以加。  
    2)問:樣本稀釋液是配好的嗎?  
    答:樣本稀釋液是配好的。  
    3)問:樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎?  
    答:可以的,直接加40ul就可以了。  
    4)問:洗滌液是濃縮的;是一次配好,還是現配現用?謝謝。  
    答:濃縮的,現配現用。  
    5)問:加入的顯色液A\B分別是什么物質?作用原理?  
    答:顯色劑A和B,是經典的TMB顯色系統。具體原理可以參考免疫方面的教科書。在這里不詳細列出。  
    6)問:終止液是什么物質?如何做到終止反應的?  
    答:終止液是2mol的硫酸溶劑。終止反應也是和原理相關。這個參考教科書!  
    7)問:稀釋液是什么成分?  
    答:標準稀釋液是PBS(PH=7.2-7.4,濃度是0.01mol/L)。樣本稀釋液是含有0.5%BSA的PBS(PH=7.2-7.4,濃度是0.01mol/L)。  
    8)問:需要避光保存的試劑是哪個?  
    答:需要避光的是顯色液B。  
    9)問:試劑盒從冰箱取出后,室溫放置會影響其效果嗎?  
    答:試劑盒在做實驗前應該要室溫平衡一小時。短時間(3、4小時)沒有任何影響。  
    10)問:樣品研磨后是立即離心,還是在4度冰箱里提取幾個小時以后再離心?  
    答:樣本研磨后立即離心即可。  
    補充:5%BSA封閉液(BlockingBuffer)適用于WesternBlotting、ELISA以及免疫組化實驗中非特異性蛋白結合位點的封閉。

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