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    基因轉(zhuǎn)染就用它,價(jià)格實(shí)惠又好用,還可以免費(fèi)試用?

    更新時(shí)間:2020-11-06 點(diǎn)擊次數(shù):1011

    陽(yáng)離子聚合物--聚乙烯亞胺(polyethyleminine,PEI)

    聚乙烯亞胺是目前研究的陽(yáng)離子聚合物非病毒基因載體,它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團(tuán)的水溶性聚合物。PEI單體中每3個(gè)原子含1個(gè)氮,并構(gòu)成同的胺基。這些胺基的pKa值不同,使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強(qiáng)的結(jié)合DNA附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。

     分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,但因?yàn)槠浯罅空姾傻拇嬖谝约胺巧锝到庑裕梢詫?dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化,顯示出較大的細(xì)胞毒性,低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四種細(xì)胞上評(píng)價(jià)交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率。

     

    不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同

    枝狀的 800 kD PEI 是*報(bào)道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑,枝狀的 25 kD PEI(25B)用HEK293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD、600 kD、800 kD 或線狀 22 kDPEI(22L)的高。

    有研究報(bào)道,比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro,轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細(xì)胞,PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,PEI pro 的毒性。經(jīng)過(guò)優(yōu)化,PEI-Max 的表達(dá)量?jī)?yōu)于 25 kD LPEI。

    PEI 介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3(W/W),提高轉(zhuǎn)染試劑比例會(huì)提高轉(zhuǎn)染效率,但是隨之細(xì)胞毒性也會(huì)增加。另外轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會(huì)影響轉(zhuǎn)染效果。

     

    陽(yáng)離子聚合物--脂質(zhì)體 

    陽(yáng)離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜,轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑,因而也廣泛用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,但因其化學(xué)合成不易,商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價(jià)格較高,遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,因此只適合于小量瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

    目前的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽(yáng)離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合,以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。HEK293 細(xì)胞是非常適合進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,很容易接收外來(lái) DNA,在合適的轉(zhuǎn)染條件下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 80% 以上, 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達(dá)90% 以上。但是傳統(tǒng)的 CHO 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對(duì)較低,只有 40% ~ 60%。

     Thermo Fisher 公司新開(kāi)發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)量有了較大的提升,但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價(jià)格較貴,不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大。

    因此,目前PEI轉(zhuǎn)染試劑,價(jià)格實(shí)惠深受廣大科研伙伴的熱愛(ài)。重點(diǎn)是超級(jí)便宜!!!便宜到什么程度呢?偷偷告訴你:據(jù)說(shuō)一次可配1L的量!1L??天啊,怎么能用的完?如此便宜實(shí)惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢

    目前,小編給大家謀福利了,免費(fèi)試用PEI轉(zhuǎn)染試劑”活動(dòng)!!

     

    品牌

    貨號(hào)

    規(guī)格

    SEROCHEM 

    PRIME-P100-1G

    1g

    SEROCHEM 

    PRIME-P100-100MG

    100mg

    SEROCHEM 

    Prime-AQ100-100ML

    100ml

    SEROCHEM 

    Prime-AQ100-5ML

    5ml

     

     

    活動(dòng)內(nèi)容:客戶(hù)可申請(qǐng)PEI轉(zhuǎn)染試劑免費(fèi)試用,單個(gè)研究組僅限申請(qǐng)1 瓶,數(shù)量不多,先到先得!

    活動(dòng)對(duì)象:所有終端

    申請(qǐng)流程:關(guān)注公眾號(hào),回復(fù)“PEI”,立即報(bào)名!

     

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