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    NK細胞活化擴增方法,Corning版

    更新時間:2018-02-08 點擊次數(shù):2232

    NK 細胞活化

    1.  熱滅活自體血漿,56°C30min。離心, 800 xg  20 min,去除沉淀。4°C 保存上清血漿,培養(yǎng)備用。
    2.  至少5倍體積的PBS(不含鈣鎂)清洗PBMCs。室溫離心500xg,10min,收集PBMCs。 PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL,使用NK活化培養(yǎng)基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
    3. 預包被T-75培養(yǎng)瓶使用前,用PBS(不含鈣鎂)清洗兩次。添加30 mL PBMC懸液到預包被T-75培養(yǎng)瓶,37°C5% CO2培養(yǎng)。

    注意:第六天之前,如果培養(yǎng)基變黃,細胞密度超過2.0 x 106 cells/mL,需要添加新鮮的NK活化培養(yǎng)基配比10%自體血漿,保持細胞密度在在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。

    NK細胞擴增

    1.  培養(yǎng)第六天,培養(yǎng)液離心,適量NK擴增培養(yǎng)基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)重懸細胞,再轉(zhuǎn)移到T-225培養(yǎng)瓶或透氣細胞培養(yǎng)袋。
    2. 每隔兩三天,根據(jù)細胞擴增狀態(tài),培養(yǎng)體系中添加新鮮的NK擴增培養(yǎng)基(1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿)保持細胞密度在5 x 105 2.0 x 106 cells/mL之間。
    3.  細胞總量到達2 x 109 收獲細胞用于CCK8 殺傷力和免疫表型檢測。

    注意:整個實驗過程中,細胞懸液吹打和培養(yǎng)容器拍打都要輕柔,以避免細胞損傷,保持細胞活性。

     

    Corning® NK細胞活化擴增培養(yǎng)套裝

    英文名:Corning® NK Expansion Kit

    中文名:Corning® NK細胞活化/擴增培養(yǎng)套裝

     

    應用:NK細胞活化擴增

    品牌產(chǎn)地:美國Corning

    保存:2°C - 8°C

     

    NK細胞是當今免疫治療常用的細胞。但是NK細胞培養(yǎng)操作難度大,對培養(yǎng)條件、培養(yǎng)技術要求很高,難以獲得高純度能的活性細胞。 Corning NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝由多個組分組成,為 NK細胞培養(yǎng)提供簡便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數(shù)量產(chǎn)量高,活性高,具有很高的殺傷效應。

    產(chǎn)品組成

    NK細胞活化培養(yǎng)基

    NK細胞活化添加劑

    NK細胞擴增培養(yǎng)基

    抗體預包被T75細胞培養(yǎng)瓶

    細胞培養(yǎng)袋

     

    產(chǎn)品特色

    擴增能力強,在14天內(nèi)可達到100倍擴增

    效應細胞比例高,可達80%

    操作方便

     

    產(chǎn)品訂購信息

     

    品牌

    貨號

    產(chǎn)品描述

    包裝

    Corning

    88-570-kit

    NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells

    NK細胞活化/擴增培養(yǎng)基套裝

    1Kit

    套裝包含

    活化用

    Pre-coated T-75 flask 抗體預包被T75細胞培養(yǎng)瓶

    1瓶

    NK primary medium NK細胞活化培養(yǎng)基

    1×50 mL

    NK primary supplement NK細胞活化添加劑

    1×1.8 mL

    擴增用

    Expansion medium NK細胞擴增培養(yǎng)基

    1×1000 mL

    配件

    細胞培養(yǎng)袋

    1 x 640 cm2

     

     

     

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