• 服務熱線

    15021010459
    技術文章
    當前位置:主頁 > 技術文章 > 細胞凍存液的凍存步驟

    細胞凍存液的凍存步驟

    更新時間:2016-11-23 點擊次數:1836
         細胞凍存液是利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。
        細胞凍存液的凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。
        細胞凍存液的凍存步驟:
        1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
        2. 取對數生長期的細胞,用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來,懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中;
        3. 離心1000rpm,5min;
        4. 去除胰蛋白酶及舊的培養液,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的zui終密度為5×106/ml~1×107/ml;
        5. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
        6. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
        7. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。

    2025 版權所有 © 重慶市華雅干細胞技術有限公司  備案號:渝ICP備14000349號-4 sitemap.xml 管理登陸 技術支持:化工儀器網

    地址:重慶市江北區金渝大道153號8棟20-14 傳真:023-63419626 郵件:sales@ys-bio.com

    重慶市華雅干細胞技術有限公司主要經營干細胞研究 干細胞治療產品 生物試劑 實驗耗材 藥物研發等產品。

    關注我們

    服務熱線

    400-021-2200

    掃一掃,關注我們

    主站蜘蛛池模板: 精品无码久久久久久久久久| 亚洲国模精品一区| 久久99精品九九九久久婷婷| 国产精品熟女高潮视频| 久久久久久青草大香综合精品| 国产精品视频色拍拍| 欧美精品色婷婷五月综合| 九九精品在线观看| 久久久久人妻精品一区二区三区| 国产精品无码国模私拍视频| 成人国内精品久久久久一区| 亚洲精品成人网久久久久久| 国产精品 一区 在线| 久久se精品一区二区| 国产精品亚洲一区二区三区在线| 亚洲精品成人网久久久久久 | 国产在AJ精品| 精品一卡2卡三卡4卡免费视频| 久久精品国产亚洲77777| 香蕉依依精品视频在线播放| 国产精品美女网站| 亚洲欧美精品伊人久久| 99在线精品视频在线观看| 亚洲精品无码鲁网中文电影| 青草青草久热精品视频在线观看| 国产精品九九九| 51精品资源视频在线播放| 精品乱人伦一区二区三区| 91麻豆精品国产| 国产成人精品高清在线观看93| 无码国产精品一区二区免费3p| 亚洲A∨精品一区二区三区| 精品国产呦系列在线观看免费| 中文字幕亚洲精品| 麻豆精品成人免费国产片| 国产成人精品亚洲日本在线| 国产精品久久久久久吹潮| 国产精品无码av在线播放| 99精品热这里只有精品| 99久久99久久久精品齐齐| 69久久夜色精品国产69|